Lo primero que hicimos fue tomar los medios condicionados que habíamos preparado la semana anterior y centrifugarlos. Luego de centrifugar, tomamos el sobrenadante (medio condicionado) para utilizarlo en el bioensayo de células Nb2.
Luego, contamos las células en una cámara de Neubauer e hicimos las cuentas respectivas para saber la cantidad de células que deberíamos poner en cada celdilla al plaquear(10.000 clulas por well).
Utilizamos dos placas de 96 wells pa
ra el experimento. En una colocamos el volumen correspondiente al Nº de células que queremos poner, y volúmenes correspondientes de medio de cultivo, y los distintos medios condicionados. En la segunda también colocamos el volumen correspondiente al Nº de células en cada well, a lo que le agregamos distintas diluciones de prolactina y llevamos a volumen con medio sin suero fetal bovino.
ra el experimento. En una colocamos el volumen correspondiente al Nº de células que queremos poner, y volúmenes correspondientes de medio de cultivo, y los distintos medios condicionados. En la segunda también colocamos el volumen correspondiente al Nº de células en cada well, a lo que le agregamos distintas diluciones de prolactina y llevamos a volumen con medio sin suero fetal bovino.
Al terminar de plaquear, pusimos las dos placas en la estufa para finalizar con el experimento.
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