Segunda Semana

En nuestro segundo día en el laboratorio, hicimos distintos tratamientos de los medios condicionados de las células IBH6 que habían sido repicadas la semana anterior. Los distintos tratamientos sirven para realizar un bioensayo que nos permita ver cómo varían las concentraciones de prolactina a distintas condiciones. Para dichos tratamientos se utilizaron los siguientes compuestos estimulantes: Epifedrina y Dexmedetomidina (agonistas adrenérgicos), y Rauwolscina (antagonista). Hicimos las diluciones correspondientes para obtener las concentraciones requeridas, y colocamos en un primer flask el medio base sólo, que nos serviría de control; en el segundo y el tercer flask colocamos epifedrina y dexmedetomidina respectivamente; y por último se colocó una mezcla de Dexmedetomidina y Rauwolscina en el cuarto flask.

Por otro lado, descongelamos la línea celular NB2. Para esto, procedimos primero a un descongelamiento rápido con agua caliente, y luego centrifugamos el medio con las células ya descongelados. Luego de centrifugar, quitamos el sobrenadante, y colocamos las células obtenidas en un flask, para luego proporcionarles el medio de cultivo propicio para su desarrollo.
Por último, recibimos una explicación teórica de lo que haríamos en el laboratorio la semana próxima.

Primer jueves en el IBYME

Jueves 14/05/09

En primer lugar, cuando llegamos al laboratorio tuvimos una pequeña clase teorica a cerca de lo que se pretende que hagamos durante algunos jueves como primera experiencia. Esta clase se trató de tecnicas para medir prolactina (RIA que sirve para medir bajas concentraciones de prolactina y bioensayo de celulas NB2 el cual detecta concentraciones aun mas bajas de prolactina activa en las celulas NB2)
En segundo lugar preparamos medio para cultivo de celulas (D-mem F12), lo llevamos a PH (7,20) y lo filtramos para esterilizar.
En tercer lugar cambiamos el medio de cultivo a celulas IBH6, MCF7 y T47D, luego de observarlas en el microscopio y ver las diferencias con respecto a su forma y tamaño.
En cuarto lugar repicamos(*) la linea celular IBH6 ya que se habia obtenido un 80% de confluencia en el medio.(se amplifico el cultivo de un flas T-25 a 4 flas T-25)
Y por ultimo preparamos medio de celulas NB2 para proximo cultivo



(*)Repicar: Tomar celulas de un glas con medio de cultivo una vez llegadas a un 80% de confluencia y pasarlas a otros glas con medio para cultivo de la misma linea celular.


Bueno, esto fue todo por nuestra primer semana en el laboratorio del IBYME, desde ya disculpen los errores en esta primer informacion, ya iremos mejorando.

Hasta la proxima!

Caro y Taly